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果蔬成分分析

'果蔬成分分析'
果蔬成分生化分析作者:最新 指导老师: 学号:(温州大学生命与环境科学学院班级) 摘要:果蔬是我们;钪谐<氖澄,大多数果蔬中含有维生素C、糖类、蛋口质等成分。这些成分对植物的生 理活动起到很人的作用,同时也是我们人体所需的营养物质。不同种类的果蔬小这些成分的含量是不同的。本实验 选取盘菜和萝卜作为研究对象,对其维牛:素C、总糖、还原糖、蛋口质含量及过氧化物酶活性进行分析。通过实验 了解萝卜和盘菜在这些成分上含虽的不同,并学握滴定法、恵酮比色法、考马斯亮兰法、聚内烯酰胺凝胶电泳法等 实验方法。关键词:萝卜、盘菜;维牛素C、总糖、还原糖、蛋口质、过氧化物酶Biochemical analysis of fiuits and vegetablesAuthor: Tutor: Number:(Class of, Department of life and Environmental Science, Wenzhou University) Abstract: Fruits and vegetables are common food in our lifb. Most fruits and vegetables contain vitamin C, sugar, protein and so on. These compositions of plants play an important role in their physiological activities, and they are also needed in human body. The contents of these compounds in different kinds of fruits and vegetables arc different. This experiment selected dish and radish as the research object, studying the vitamin C, total sugar, reducing sugar and protein's contents? At the same time, it analyzed the peroxidase's activity. Through the experiment, we acknowledged that radish and dish's component contents are different while mastering some experimental methods such as titration, anthrone colorimetry, coomassie brilliant blue method and polyacrylamide gel electrophoresis method? Key words: radish, dish, vitamin C, total sugar, reducing sugar, protein, peroxidase1.前言:萝卜含有能诱导人体自身产牛?干扰素的多种微量元素;白萝卜富含维生素C,而维生素C为抗氧化剂,能抑制 黑色素合成,阻止脂肪氧化,防止脂肪沉积。[1]白萝卜中含有大量的卅i物蛋白、维生素C和叶酸,食入人体后可 洁净血液和皮肤,同时还能降低胆固醇,有利于血管弹性的维持。[1]萝卜在屮国民间素有“小人参”的美称。一到 冬天,便成了家家户户饭桌上的常客,现代营养学研究表明,萝卜营养丰富,含有丰富的碳水化合物和多种维牛素, 其中维生素C的含屋比梨高8—10倍。[2]盘菜[3]又称芜菁(turnip),大头菜,大头芥,根如圆萝卜,盐腌晒十作咸菜名梳菜;淮ǔ葡愦笸。芸 臺属芸耋种芜菁亚种能形成肉质根的二年牛草本植物。别名蔓善、圆根、盘菜等。染色体数2n=2x=20o肥大肉质 根供食用,每100克鲜重含水分87?95克、糖类3.8?6.4克、粗蛋白0.4?21克、纤维素0.8-2.0克、维生素 C19.2?63.3毫克,以及其他矿物盐。肉质根柔嫩、致密,供炒食、煮食或腌渍。欧洲、亚洲和美洲均冇栽培。2?材料、试剂与器材2.1材料萝卜和盘菜2.2试剂(一) 果蔬中维生素C的测量测定1%草酸溶液、2%草酸溶液、维生素C标准液、氧化型0.1%2, 6—二氯酚靛酚溶液(二) 果蔬中总糖及还原糖含量测定恿酮试剂、标准葡萄糖溶液(O.lmg/mL)、6mol/L Hcl溶液、20%NaoH溶液(三) 果蔬中蛋口质含量测定标准蛋白质溶液、考马斯亮兰G—250染料试剂、0.05mol/LTris—Hcl缓冲液(PH6.8)(四) ①聚丙烯酰胺凝胶电泳分离过氧化物酶同工酶实验A (分离胶缓冲液)、B (浓缩胶缓冲液)、C (分离胶贮液)、D (浓缩胶贮液)、E核黄素、F蔗糖、TEMED、 0.14%过硫酸钱、电极缓冲液、封板胶、上样缓冲液、染色液②过氧化物酶活性的测定100mmol/L磷酸缓冲液PH6.0反应混合液:100mmol/L磷酸缓冲液(PH6.0) 50ml于烧杯屮,加入愈创木酚28 ul,于磁力搅拌器上加热搅拌,直 至愈创木酚溶解,待溶液冷却后,加入30%过氧化氢19ul,混合均匀,保存于冰箱中。2.3器材? 玻璃漏斗,三角烧瓶,试管,量筒(5mL、10mL、50mL、500mL),吸管(O.lmL、0?2mL、0.5mL> l.OmL、 5.0mL> 10ml) , lOOmL容量瓶,250mL烧杯,lOOmL锥形瓶等各种玻璃器皿;?剪刀,滤纸,研钵,台秤;? 电炉;?电子分析天平;?可见光分光光度计;?恒温水浴锅;? 高速离心机(lOOOOr/min);?漩涡混合器;? 垂直板电泳槽及附件(玻璃板、硅胶条、梳子、导线等);? 直流稳压稳流电泳仪;? 微量进样器(50卩1):?微量滴定管及架;3?实验方法3.1试验设计实验一果蔬中维生素c的定量测定I步骤1、 制备新鲜果蔬液:如洗净新鲜果蔬,擦干表面水分,剥去外皮,称20.0g果蔬放入50mL量筒小,加2%草 酸液至40mL刻度处(即稀释1倍)。用玻璃棒搅拌,静置10分钟,过滤,滤液即是(若样品中含大屋铁,可用 8%醋酸溶液提取,可在一定程度上延缓还原染料)。2、 染料液装入滴定管中:应驱除滴定管中的气泡,调整好零点。3、 滴定维生素C标准液:吸取l.OmL维牛素C标准液放入锥形瓶中,加9mLl%草酸溶液,摇匀,用染料液 滴定至微红色保持15秒不褪色即为终点。记下所用去染料液数量,可算出ImL染料相当于多少mg维生索C。4、 滴定样品液:吸取10.0mL样品液放入锥形瓶屮,同上操作进行滴定。可做两份,求平均值。 II实验结果实验数据一1.标准液滴定测定序号123标准Vc同量(mg)0.10.10.1染液用量初读数/mL1.101.
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